4月25日，GE生命科学部蛋白纯化策略及层析填料应用讲座在我校生工学院B314会议室。

本次讲座邀请GE公司生命科学部产品专家周建建介绍了关于蛋白质纯化的相关策略及层析填料应用方面的内容，主要内容如下：

1、 蛋白纯化常用到有4种层析技术。凝胶过滤层析，依据蛋白质分子量的差异进行蛋白质分离；离子交换层系，依据蛋白质表面所带电荷进行分离；疏水层析，依据蛋白质之间疏水性的差异进行分离；亲和层析，生物分子间的特异性吸附，是纯化效率最高的一种层析技术。根据纯化目的不同，对目的蛋白最终纯度的要求也不同，比如，治疗用的生物药要求纯度达到99以上，而免疫用蛋白可能达到90%就可以，因此在蛋白纯化时需要将这几种层析技术合理的组织在一起，运用互补的层析技术进行纯化。考虑上样条件和洗脱条件的不同，及每种层析技术本身的特点，尽量使用互补的层析技术纯化蛋白。

2、 层析填料应用方面，针对不同的表达宿主选择合适的填料进行纯化。纯化抗体可以使用Protein A和Protein G，根据不同种属来源去选择，如果需要交高的纯度还可以在亲和层析后面再衔接离子交换层析或者分子筛层析以达到更高的纯度。对于抗体片段可以选择特异性的亲和填料进行亲和层析，比如Capto L等填料。在标签蛋白的纯化方面，组氨酸标签蛋白可以离子键形式和金属镍离子发生吸附作用，再用咪唑可竞争洗脱，得到只带有组氨酸标签的目的蛋白，达到纯化的目的。组氨酸标签蛋白纯化可以从buffer条件、上样量、金属离子种类及添加剂种类等几个方面进行条件优化以获得更高纯度和具有活性的蛋白质分子。

附件：蛋白纯化策略及层析填料应用讲座PDF